1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱
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理論塔板數(shù)
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基 質(zhì)
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分離模式
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排阻限
普魯蘭
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粒徑
(um)
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尺寸I.D.×L
(mm)
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SB-802.5 HQ
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16,000 以上
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聚羥基甲基丙
烯酸酯
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尺寸排阻
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1×104
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6
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8.0×300
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產(chǎn)品名稱
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最大耐壓(MPa)
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最大使用流量(mL/min)
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使用溫度范圍(℃)
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使用PH 范圍
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出廠時(shí)溶劑
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SB-802.5 HQ
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5.0
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1.2
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4~70
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3~10
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0.02% NaN3 aq.
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通常使用流量:0.5~1.0 mL/min;溶劑置換時(shí)流量:<0.5 mL/min
2 使用注意事項(xiàng)
Ⅰ 流動(dòng)相
SB-802.5 HQ 是水系凝膠過濾色譜柱,流動(dòng)相只使用水時(shí),樣品易發(fā)生吸附。為使樣品完全按照尺寸排阻法來分離,選擇分析樣品最適合的流動(dòng)相非常關(guān)鍵。
1) 非離子親水性樣品及離子親水性樣品
一般使用鹽溶液或緩沖液。代表性的鹽及緩沖液如下表。
鹽溶液 氯化鈉、硝酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、硫酸銨
緩沖液 磷酸緩沖液、鹽酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液
注意:①流動(dòng)相的鹽濃度要低于0.5M。(適合0.05~0.5M)
鹽濃度在0.2M 以下時(shí),置換流量0.5mL/min。
鹽濃度在0.2~0.5M 時(shí),置換流量0.3 mL/min。
②流動(dòng)相PH3~10
③流動(dòng)相含有氯離子的情況下PH 要大于6。
2) 非離子疏水性樣品及離子疏水性樣品
為抑制疏水性樣品的疏水性吸附,流動(dòng)相中添加極性有機(jī)溶劑。
離子性樣品中仍需要加鹽。
置換含有極性有機(jī)溶劑的流動(dòng)相時(shí),流量設(shè)定為0.5 mL/min。
3) 蛋白質(zhì)樣品
作為蛋白質(zhì)改性劑的尿素或鹽酸胍水溶液可以用作流動(dòng)相。對(duì)于膜蛋白質(zhì)等通常水溶液中溶解性差的樣品,可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性劑于流動(dòng)相中。
Ⅱ 注意事項(xiàng)
1) 色譜柱安裝前,使用流動(dòng)相對(duì)流路進(jìn)行完全置換。
2)色譜柱在高溫下使用,分析結(jié)束后首先將泵的流量設(shè)為0.5mL/min,關(guān)閉色譜柱加熱開關(guān),持續(xù)送液直至色譜柱降至室溫。
在色譜柱冷卻到室溫前從裝置中取出,色譜柱會(huì)吸入空氣導(dǎo)致性能降低。
3)流動(dòng)相使用了含有鹽的水溶液,或者三天以上不使用的情況下,流路及色譜柱要置換成離子交換水。流量要求0.5mL/min 以下。
4)保護(hù)柱不僅是除去樣品中的污染物來保護(hù)分析柱的,對(duì)于泵的脈動(dòng)或壓力變化也有一定程度的保護(hù)作用。因此盡量使用保護(hù)柱。
◎如果使用時(shí)超過了規(guī)定壓力、規(guī)定流量,致使色譜柱性能降低,這是無法復(fù)原的,對(duì)此請(qǐng)?zhí)貏e注意。
3 色譜柱性能的測試方法
按照下面的條件,對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測試(詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA)
色譜柱
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流動(dòng)相
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流量
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色譜柱溫度
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樣品
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注入量
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SB-802.5 HQ
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H2O
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1.0mL/min
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室溫約25℃
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乙二醇水溶液
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5μL
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理論塔板數(shù)的計(jì)算公式