1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱
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理論塔板數(shù)
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基 質(zhì)
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分離模式
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排阻限
普魯蘭
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粒徑
(um)
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尺寸I.D.×L
(mm)
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SB-802 HQ
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12,000 以上
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聚羥基甲基丙
烯酸酯
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尺寸排阻
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4×103
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8
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8.0×300
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產(chǎn)品名稱
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最大耐壓(MPa)
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最大使用流量(mL/min)
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使用溫度范圍(℃)
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使用PH 范圍
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出廠時溶劑
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SB-802 HQ
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5.0
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1.2
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4~70
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3~10
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0.02% NaN3 aq.
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通常使用流量:0.5~1.0 mL/min;溶劑置換時流量:<0.5 mL/min
2 使用注意事項
Ⅰ 流動相
SB-802 HQ 是水系凝膠過濾色譜柱,流動相只使用水時,樣品會發(fā)生吸附。為使樣品完
全按照尺寸排阻法來分離,選擇分析樣品最適合的流動相非常關(guān)鍵。
1) 非離子性親水性樣品及離子性親水性樣品
一般使用鹽溶液或緩沖液。代表性的鹽及緩沖液如下表。
鹽溶液
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氯化鈉、硝酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、硫酸銨
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緩沖液
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磷酸緩沖液、鹽酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液
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注意:①流動相的鹽濃度要低于0.5M。(適合0.05~0.5M)
鹽濃度在0.2M 以下時,置換流量0.5mL/min。
鹽濃度在0.2~0.5M 時,置換流量0.3 mL/min。
②流動相PH3~10
③流動相含有氯離子的情況下PH 要大于6。
2) 非離子性疏水性樣品及離子性疏水性樣品
為抑制疏水性樣品的疏水性吸附,流動相中添加極性有機溶劑。
離子性樣品中仍需要加鹽。
置換含有極性有機溶劑的流動相時,流量設(shè)定為0.5 mL/min。
3) 蛋白質(zhì)樣品
作為蛋白質(zhì)改性劑的尿素或鹽酸胍水溶液可以用作流動相。對于膜蛋白質(zhì)等通常水溶液中溶解性差的樣品,可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性劑于流動相中。
Ⅱ 注意事項
1) 色譜柱安裝前,使用流動相對流路進行完全置換。
2)色譜柱在高溫下使用,分析結(jié)束后首先將泵的流量設(shè)為0.5mL/min,關(guān)閉色譜柱加熱開關(guān),持續(xù)送液直至色譜柱降至室溫。
在色譜柱冷卻到室溫前從裝置中取出,色譜柱會吸入空氣導致性能降低。
3)流動相使用了含有鹽的水溶液,或者三天以上不使用的情況下,流路及色譜柱要置換成離子交換水。流量要求0.5mL/min 以下。
4)保護柱不僅是除去樣品中的污染物來保護分析柱的,對于泵的脈動或壓力變化也有一定程度的保護作用。因此盡量使用保護柱。
◎如果使用時超過了規(guī)定壓力、規(guī)定流量,致使色譜柱性能降低,這是無法復原的,對此請?zhí)貏e注意。
3 色譜柱性能的測試方法
按照下面的條件,對色譜柱進行性能測試(詳情請參考色譜柱附帶的出廠檢查報告COA)
色譜柱
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流動相
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流量
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色譜柱溫度
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樣品
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注入量
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SB-802 HQ
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H2O
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1.0mL/min
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室溫約25℃
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乙二醇水溶液
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5μL
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理論塔板數(shù)的計算公式