1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱(chēng)
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理論塔板數(shù)
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基 質(zhì)
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分離模式
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抗衡離子
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排阻限
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尺寸I.D.×L(mm)
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KS-804
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17,000 以上
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苯乙烯-二乙烯基苯共聚物
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SEC+配位體交換
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磺基(Na2+)
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400,000
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8.0×300
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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粒徑(μm)
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最大耐壓(MPa)
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常用流量(mL/min)
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最大使用流量(mL/min)
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使用溫度范圍(℃)
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出廠時(shí)溶劑
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KS-804
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6
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5.0
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0.5~1.0
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1.5
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~85
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H2O
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標(biāo)準(zhǔn)使用條件:流動(dòng)相 H2O;流量 0.5~1.0 mL/min;色譜柱溫度 50~85℃
2 使用注意事項(xiàng)
Shodex SUGAR KS-804 可以只用水作流動(dòng)相,對(duì)單糖、二糖、寡糖、多糖及糖醇等碳水化合物或非離子性的水溶性物質(zhì)進(jìn)行分離。
Ⅰ 使用注意事項(xiàng)
(1)操作上注意
1)作為流動(dòng)相的脫離子水,用0.45μm 的過(guò)濾器過(guò)濾,加熱到60℃后,放入超聲波清洗器中,邊超聲邊減壓充分脫氣。使用了在線脫氣機(jī)的話(huà)可省略前面的脫氣操作。
2)避免突然壓力或流量的改變。
不要超過(guò)色譜柱的壓力上限。超過(guò)壓力上限的話(huà)會(huì)使性能降低,無(wú)法回復(fù)。
3)糖類(lèi)在色譜柱溫度60℃以上分析分離效果好。但不要超過(guò)85℃
4)樣品親水性高會(huì)引起吸附,使保留體積增大。此時(shí)在流動(dòng)相中添加乙醇、乙腈等極性有機(jī)溶劑,可減少保留體積。要注意添加有機(jī)溶劑的濃度要在50%以下。
5)流動(dòng)相去離子水中如果混有有機(jī)物或金屬離子的話(huà),會(huì)導(dǎo)致糖峰形變寬。
(2)安裝色譜柱
1)色譜柱安裝之前請(qǐng)用分析用流動(dòng)相對(duì)裝置進(jìn)行完全置換。
2)如果裝置中使用了與水不互溶的有機(jī)溶劑的話(huà),首先用丙酮、乙醇等與水互溶的有機(jī)溶劑置換后再置換成水。
3) 如果使用了進(jìn)樣環(huán),請(qǐng)別忘記對(duì)進(jìn)樣環(huán)中的溶劑和空氣進(jìn)行置換。
4)色譜柱連接時(shí)注意避免空氣混入。
(3)色譜柱拆取與保存
1)色譜柱加熱使用后,在保持0.2mL/min 送液狀態(tài)下色譜柱冷卻至室溫。
2)色譜柱從裝置中取下后,放在溫度波動(dòng)不大(18~28℃)的場(chǎng)所保存。
絕對(duì)要避免色譜柱內(nèi)溶劑凍結(jié)現(xiàn)象的發(fā)生。
Ⅱ 樣品前處理
(1)樣品用流動(dòng)相溶解。
(2)樣品溶液與流動(dòng)相不同時(shí),進(jìn)樣后會(huì)生成沉淀,堵塞色譜柱的情況。
為了降低溶劑峰,樣品盡量用與流動(dòng)相相同的溶劑來(lái)溶解。
(3)樣品是水溶性,并且含有乙醇等有機(jī)溶劑時(shí),要用水將有機(jī)溶劑濃度稀釋到20%以下。
(4)樣品含有蛋白質(zhì)時(shí),要除去蛋白質(zhì)。
樣品溶液約5mL 中加入數(shù)滴磺基水楊酸溶液(20g/dL)混合后,再用0.45μm 過(guò)濾器過(guò)濾。
3 色譜柱性能的測(cè)試方法
按照下面的條件,對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測(cè)試(詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA)
色譜柱
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流動(dòng)相
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流量
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色譜柱溫度
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樣品
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注入量
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KS-804
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H2O
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1.0mL/min
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50℃
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0.8%葡萄糖
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5μL
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4 色譜柱的再生
如果色譜柱吸附了不純物,果糖或葡萄糖的峰會(huì)變寬。
可按照下面的操作對(duì)色譜柱進(jìn)行再生。
色譜柱
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再生液
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色譜柱溫度
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操作
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KS-804
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0.01NNaOH 水溶液
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50℃
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0.5mL/min 送液
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再生后請(qǐng)置換成去離子水。
(也可用0.1N NaOH 水溶液進(jìn)樣40μL 的方法來(lái)進(jìn)行再生)